对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。在细胞培养过程中，还需注意以下几点以确保细胞健康生长：
**培养环境**：小鼠肺大动脉平滑肌细胞应在37℃、5% CO?的恒温恒湿培养箱中培养，以模拟体内生理环境。保持培养箱内的清洁与无菌，定期更换CO?吸收剂和加湿用水。
**培养基选择**：使用专为平滑肌细胞设计的培养基，如高糖DMEM或RPMI 1640，并补充10%胎牛血清，以满足细胞生长的营养需求。根据细胞生长状态适时调整血清比例。
**换液频率**：贴壁细胞一般每隔2-3天换液一次，以去除代谢产物和死细胞，保持培养环境的新鲜。悬浮细胞则需更频繁地观察，根据细胞密度和生长速度调整换液时间。
**细胞冻存与复苏**：若需长期保存细胞，可在对数生长期进行冻存。使用含10% DMSO的完全培养基作为冻存液，遵循慢冻快融原则。复苏时，快速解冻细胞并直接接种于预热的培养基中，减少细胞损伤。
遵循上述指南，可成功培养并维持小鼠肺大动脉平滑肌细胞的活性与增殖能力，为后续实验提供稳定可靠的细胞来源。
