Anti-ACA11抗体,拟南芥ACA11抗体溶解方法:方法1:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或*),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;
方法2:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(*),至少三年有效。
酶标抗体效价测定程序:各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效价测定):
1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;
2、37°C包被60min或4°C过;
3、PBST洗板3次,5min/次;
4、加入倍比稀释的HRP标记抗体 0.1ml/孔;
5、37°C 30min;
6、PBST洗板5min/次×3;
7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;
8、终止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;
9、450nm 测定OD值;
10、阳性OD值比对照值大3倍,为判断效价稀释度。
11.抗体修复方式:
方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;
方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。