PI3/Elafin 试剂盒说明书注意事项

1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

【产品名称】   PI3/Elafin 试剂盒说明书

【英文名称】Human  PI3/Elafin (Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived) ELISA Kit
【中文名称】人皮肤衍生肽酶抑制剂3(PI3/Elafin)试剂盒
【货号】 GOY-H0161

【品牌】  Guyan Biology

【规格】   96T/48T

【单位】   盒

【价格】   询价

PI3/Elafin 试剂盒说明书操作步骤

1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide英文名称：XTP4磷酸半乳苷酸转移酶1抗体

CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1)英文名称：CCBR1糖原蛋白1抗体

phospho-CREB-1 英文名称：XIAP葡萄糖合成酶2抗体

ADRA2 peptide英文名称：XBP1谷草转氨酶2抗体

CRF (Corticotropin-Releasing Factor)英文名称：Hepatitis B virus X protein葡萄糖-6磷酸脱氢酶抗体

CT (Calcitonin )英文名称：Hepatitis B virus X protein葡萄糖转运蛋白5抗体

CT-R (Calcitonin receptor)英文名称：XAB2 葡萄糖合成酶1抗体

Ferritin peptide英文名称：XDHG蛋白修补结构域蛋白8抗体
PI3/Elafin 试剂盒说明书C16orf7英文名称：Anillin人组织蛋白去乙酰化酶(HD)免疫试剂盒

C16orf57英文名称：Adenovirus 5 E1A binding protein人组织蛋白酶S(CTSS)免疫试剂盒

C3orf37英文名称：APOA1人组织蛋白酶L1(CTSL1/CTSL)免疫试剂盒

C3orf49英文名称：ATG16L人组织蛋白酶K(cath-K)免疫试剂盒

C1orf220英文名称：phospho-ATG4D(Ser15)人组织蛋白酶H(CTSH)免疫试剂盒

Calcyphosine 1英文名称：Phospho-ATG4C(Ser451)人组织蛋白酶G自身抗体(Cath G Ab)免疫试剂盒

Calcyphosine 2英文名称：phospho-ATG7(Ser95)人组织蛋白酶G(cath-G)免疫试剂盒

phospho-CSEN (Ser63)英文名称：phospho-ATG16A(Ser287)人组织蛋白酶D(cath-D)免疫试剂盒
PI3/Elafin 试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法

1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PI3/Elafin 试剂盒说明书试验原理：

是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。