商品属性：

测定原理：

试剂组成和配制：

酶液提取：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。  
测定操作：
1、 分光光度计 40℃预热 30min 以上，调节波长至 333nm，蒸馏水调零。 2、 准备 96 孔 UV 板一块（非普通酶标板，普通酶标板只能透过可见光，不能透过紫外光，检测波长小于 340nm 务必使用 3、 样本测定 （1）在试剂二中加入 5mL 试剂一充分溶解混匀，置于 40℃水浴预热 10min；现配现用（配好后 24h 内用完）； （2） 对照管：在微量石英比色皿或 96 孔 UV 板中加入 10μL 样本和 190μL 试剂一，混匀，立即记录333nm 处 40℃反应 3 值 A1。 （3）测定管：在微量石英比色皿或 96 孔 UV 板中加入 10μL 样本和 190μL 试剂二，混匀，立即记录333nm 处 40℃反应 3 值 A2，计算 ΔA=A2-A1。每个测定管设一个对照管。 
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 （1）按样本蛋白浓度计算：单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟生成 1 nmol4-香豆酸辅酶 A 定义为一个酶活力单位。4CL （nmol/min/mgprot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=31.75×ΔA÷Cpr （2）按样本鲜重计算：单位定义：每 g 组织每分钟生成 1 nmol 4-香豆酸辅酶 A 定义为一个酶活力单位。 4CL（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=31.75×ΔA÷W （3）按细菌或细胞密度计算： 单位定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟生成 1 nmol 4-香豆酸辅酶 A 定义为一个酶活力单位。 4CL（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(500×V 样÷V 样总) ÷T=0.063×ΔA V 反总：反应体系总体积，1×10-3 L；ε：4-香豆酸辅酶 A 摩尔消光系数，2.1×104 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V 样 积，0.05 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量， 细胞总数，500 万。 
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