H2S含量测试盒微量法

商品属性：

测定意义：

H2S 是一种新型气态信号分子,存在于脑内的神经递质,生理浓度的 H2S 对神 经 系 统海马的长时程增 强 功 能具有重要的调 发性高 血 压、出血性休克及肝 硬 化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。

测定原理：

H2S 与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝,亚甲基蓝在 665nm 处有 吸收峰,通过测定其吸光值可 量。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、蒸馏水  

试剂组成和配制：

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。 试剂一:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。 试剂二:液体 16mL×1 瓶,4℃保存。 试剂三:液体 8mL×1 瓶,4℃避光保存。 试剂四:液体 8mL×1 瓶,4℃保存。 试剂五:液体 1.5mL×1 管,4℃避光保存。

样品处理: 
1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 100 10min,取上清,置冰上待测。 2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后10000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。 3. 血清(浆):直接测定。  
测定操作：
1、 酶标仪预热 30min,调节波长至 665nm。
2、 操作表

计算公式：
用 96 孔板测定的计算公式如下 标准曲线回归方程为：y = 0.0022x，R2 = 0.9988 （1）组织样品 a.按照蛋白浓度计算 H2S（nmol/mg prot）= 0.0022 ΔA ×V 反总÷(V 样×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr b.按照样本重量计算 H2S（nmol/g 鲜重）= 0.0022 ΔA ×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)= 681.8×ΔA÷W (3) 细胞 H2S（nmol/104 cell）= 0.0022 ΔA ×V 反总÷（V 样÷V 样总×细胞数量(万个)）=681.8×ΔA÷ 细胞数量（万个） （2）液体样品 H2S（nmol/mL）= 0.0022 ΔA ×V 反总÷V 样= 681.8×ΔA V 反总：反应总体积，0.225mL；V 样：反应中样品体积，0.15mL；V 样总：加入提取液体 积，1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL 注意事项 检出限为 1nmol/mL。
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