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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 上海谷研 |
货号 | GOY-0671PC |
保存条件 | 低温冷藏 |
英文名称 | Mouse Lung: Normal Lung Derivatives |
保质期 | 详见说明书个月 |
公司有大量的优质细胞,还提供小鼠肺组织提取物 说明书的全程后期服务,可以向专业人士咨询详细的小鼠肺组织提取物 说明书细胞培养条件,冻存方法,及相关培养技术。
小鼠肺组织提取物 说明书【Mouse Lung: Normal Lung Derivatives】
小鼠肺位于胸腔内,主要包含内皮,上皮,成纤维三种细胞。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠肺组织中高质量的总RNA,PCR准备的第一条cDNA链,蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
小鼠肺组织提取物 说明书总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4>Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。
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布芬相关物质C标准品CAS:38861-78-8进口、国产规格:0.2ml×3ampules
IdarubicinHydrochloride盐酸依达比星标准品CAS:57852-57-0进口、国产规格:50mg
Idoxuridine碘苷标准品CAS:54-42-2进口、国产规格:250mg
Ifosfamide异环磷酰胺标准品CAS:3778-73-2进口、国产规格:500mg
Imidazole咪唑标准品CAS:288-32-4进口、国产规格:200mg
Imidurea双咪唑烷基脲标准品CAS:39236-46-9进口、国产规格:200mg
Iminodibenzyl亚氨基二苄标准品CAS:494-19-9进口、国产规格:25mg
小鼠肺组织提取物 说明书端粒酶卡哈尔体蛋白抗体 TCAB1
WDR23蛋白抗体 WDR23
信号通路WNT10B抗体 WNT10B
EBV核蛋白2抗体 WAPL
Wnt信号受体蛋白抗体 Wnt receptor
富含脯氨酸同源蛋白1抗体 WAVE 1
原癌基因WIP1抗体 PPM1D
信号通路Wnt2B抗体 WNT2B
WRCH1抗体 WRCH-1
丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK3抗体 WNK3 protein
WEE1蛋白抗体 WEE1 protein
信号通路Wnt9a抗体 WNT9A
小鼠肺组织提取物 说明书【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
小鼠肺组织提取物 说明书待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
【注意事项】
注意事项:
1. 收到小鼠肺组织提取物 说明书后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。