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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 上海谷研 |
货号 | GOY-0594PC |
保存条件 | 低温冷藏 |
英文名称 | Lung: Normal Human Bronchial Derivatives |
保质期 | 详见说明书个月 |
人组织提取物规格【Lung: Normal Human Bronchial Derivatives】
表面的上皮细胞构成了基底柱状结构,能清除粘液纤毛。产生和分泌大量化学介质和细胞因子形成高度复杂的宿主防御系统等主要功能。公司科技提供来自新鲜或冷冻人组织中高质量的总RNA,PCR准备的第一条cDNA链,蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院,采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
人组织提取物规格总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4>Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。
公司有大量的优质细胞,还提供人组织提取物规格的全程后期服务,可以向专业人士咨询详细的人组织提取物规格细胞培养条件,冻存方法,及相关培养技术。
人组织提取物规格【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
人组织提取物规格待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
【注意事项】
注意事项:
1. 收到人组织提取物规格后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
基因甲基化程度定量分析试剂盒5次特价促销
基因甲基化程度定量分析试剂盒20次特价促销
基因靶标技术试剂盒5次特价促销
肌动蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒20次特价促销
霍乱弧菌(Vibrio cholerae)鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒20次特价促销
火炬松(loblolly pine)培养基500毫升溶液/片剂特价促销
活体组织氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子)20次特价促销
活体组织氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(次氯酸离子)20次特价促销
DeferoxamineMesylate去铁铵标准品CAS:138-14-7进口、国产规格:500mg
DehydroaceticAcid脱氢乙酸标准品(酮式)CAS:520-45-6进口、国产规格:200mg
DehydrocarteololHydrochloride盐酸脱氢卡替尔标准品CAS:进口、国产规格:100mg
DehydrocholicAcid去氢胆酸标准品CAS:81-23-2进口、国产规格:200mg
DemecariumBromide地美溴铵标准品CAS:56-94-0进口、国产规格:250mg
盐酸地美环素标准品CAS:64-73-3进口、国产规格:200mg
DenatoniumBenzoate苯甲地那铵标准品CAS:86398-53-0进口、国产规格:200mg
人组织提取物规格骨骼肌细胞线粒体膜蛋白PARL抗体 PARL
磷脂爬行酶3抗体 PLSCR3
多核苷酸磷酸化酶蛋白抗体 PNPT1
胃肠道相关酪氨酸激酶抗体(蛋白酪氨酸激酶5) PTK5
PEST含核蛋白抗体 PCNP
磷酸化p53结合蛋白1抗体 phospho-p53BP1 (Ser25 + Ser29)
蛋白磷酸酶2Cα抗体 PP1A
磷酸化桩蛋白Paxillin抗体 Phospho-Paxillin(Tyr31)
磷酸化蛋白激酶Aβ抗体 phospho-PKA beta(Ser338)
蛋白激酶A受体2α亚基抗体 PKA R2
神经细胞胞浆蛋白9.5抗体(蛋白基因产物9.5) PGP9.5
磷酸化蛋白激酶A受体2α亚基抗体 phospho-PKA R2 (Ser96)