大鼠小肠平滑肌细胞提取物费用【Rat Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cell Derivatives】
 大鼠小肠平滑肌细胞提取物是从大鼠小肠平滑肌细胞提取的，大鼠小肠平滑肌细胞从正常大鼠小肠组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

大鼠小肠平滑肌细胞提取物费用总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4>Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

公司有大量的优质细胞，还提供大鼠小肠平滑肌细胞提取物费用的全程后期服务，可以向专业人士咨询详细的大鼠小肠平滑肌细胞提取物费用细胞培养条件，冻存方法，及相关培养技术。

大鼠小肠平滑肌细胞提取物费用【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【细胞冻存】

大鼠小肠平滑肌细胞提取物费用待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

【注意事项】

注意事项：

1. 收到大鼠小肠平滑肌细胞提取物费用后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

进口胎牛血清（特优级 Gibco）REF:16000-044500mL请询价

国产优级胎牛血清（无噬菌体，低内毒素 四季青）100mL请询价

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完全F12K培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500 mL请询价

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A172(人脑细胞)5×106cells/瓶×2

NZCYM琼脂/NZCYM AgarBR100克国产/进口

中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus

东京根霉 Rhizopus tonkinensis苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis

叙利亚仓鼠肾细胞泡盛曲霉 Aspergillus awamori

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna庆丰链霉菌 Streptomyces qingfengmyceticus

293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系苜蓿中华根瘤菌

人肺腺细胞巨大芽胞杆菌 Bacillus megaterium

好食脉孢菌 Streptomyces venezuelae var.spiralis粘质沙雷氏菌 Serratia marcescens

A2780(人卵巢细胞)A3(人T淋巴细胞细胞)

Poly-D-lysine溶液戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus

糖丁酸梭菌 Clostridium saccharobutyricum苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis

HBL-100(人整合SV40基因的腺上皮细胞)烟曲霉 Aspergillus fumigatus
大鼠小肠平滑肌细胞提取物费用酪氨酸蛋白激酶受体B6抗体 EphB6

ETV3L蛋白抗体 ETV3L

溶血磷脂酸受体蛋白1抗体 LPA1

溶血磷脂酸受体蛋白2抗体 LPA2

溶血磷脂酸受体蛋白3抗体 LPA3

内皮细胞的分化蛋白6抗体 EDG6

外生性骨疣样蛋白2抗体 EXTL2

磷酸化eIF4E结合蛋白抗体 phospho-EIF4EBP1 (Ser100)

内皮细胞特异性分子1抗体 ESM1

真核翻译起始因子3F抗体 eIF3F

磷酸化eIF4E结合蛋白抗体 phospho-EIF4EBP1(Ser111)

真核翻译起始因子3H抗体 eIF3H