小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物说明书【Mouse Brain: Normal Aortic Smooth Muscle Cells Derivatives】
 小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物是从小鼠原代脑动脉平滑肌细胞提取的，小鼠原代脑动脉平滑肌细胞从正常小鼠脑组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物说明书总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4>Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

公司有大量的优质细胞，还提供小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物说明书的全程后期服务，可以向专业人士咨询详细的小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物说明书细胞培养条件，冻存方法，及相关培养技术。

小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物说明书【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【细胞冻存】

小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

【注意事项】

注意事项：

1. 收到小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物说明书后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

胎盘绒毛膜细胞　原装/进口　1 x 10^6 cells/vial

胎盘羊膜细胞　现货供应　5 x 10^5 cells/vial

胎盘滋养层细胞　特价促销　5 x 10^5 cells/vial

外周血白细胞　原装/进口　5 x 10^5 cells/vial

外周血白细胞　现货供应　5 x 10^5 cells/vial

外周血白细胞　特价促销　20 reactions

成纤维细胞　原装/进口　200 μg

上皮细胞　现货供应　200 μg
Caov-3(人突状卵巢腺细胞)去甲斑蟊素

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. Lactis酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人海马神经元Lec1(仓鼠卵巢细胞)

光滑青霉酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人脑细胞田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

肝细胞HBV病毒株枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis

亚利桑纳沙门氏菌 Salmonella arizona酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

MDA-MB-231, 人腺细胞人胆囊细胞

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人宫颈肠转移细胞H9c2大鼠心肌细胞（ATCC来源）

科恩根霉酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人脉络膜微细胞完全培养基粪产碱菌 Alcaligenes faecalis
小鼠脑动脉平滑肌细胞提取物说明书磷酸甘油酸脱氢酶抗体 PHGDH

磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亚单位3抗体 phospho-PIK3C3(Ser282)

磷酸化泌乳素抗体 phospho-PRL (Ser163)

半胱天冬酶-3酶原抗体 pro-caspase-3

细胞质磷酸酶1抗体 Phospho1

维生素D低磷性蛋白 PHEX

多通道膜蛋白PTCHD2抗体 PTCHD2

修补相关蛋白PTCHD3抗体 PTCHD3

磷酸化髓鞘转录因子1激酶抗体 phospho-PKMYT1(Thr495)

磷酸化血小板源性生长因子受体α Phospho-PDGFRA(Tyr988)

髓鞘转录因子1激酶抗体 PKMYT1

磷酸化血小板源性生长因子受体α Phospho-PDGFRA(Tyr572)+PDGFRB(Tyr579)