以下是小鼠脑成纤维细胞提取物规格产品说明：

小鼠脑成纤维细胞提取物规格【Mouse Brain: Normal Brain Fibroblasts Derivatives】

小鼠脑成纤维细胞提取物是从小鼠原代脑成纤维细胞提取的，小鼠原代脑成纤维细胞从正常小鼠脑组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4>Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

细胞培养方法：

1、小鼠脑成纤维细胞提取物规格细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

注意事项：

冻存细胞接收后小鼠脑成纤维细胞提取物规格的处理：

1.干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏；

2.收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

复苏细胞接收后的处理：

1.收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

3.建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。

4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

以下是小鼠脑成纤维细胞提取物规格的相关产品：

组织源性原代细胞　现货供应　200 μg

成纤维细胞　特价促销　10 μg

平滑肌细胞　原装/进口　5 x 10^5 cells/vial

上皮细胞　现货供应　20 reactions

前脂肪细胞　特价促销　200 μg

前脂肪细胞　原装/进口　200 μg

癌组织源性原代细胞　现货供应　10 μg

胎儿真皮成纤维细胞　特价促销　5 x 10^5 cells/vial
CCDA添加剂/CCDA Supplement添加于200Lccda基础中2毫升×10支国产/进口

K7M2 wt(小鼠成骨细胞)5×106cells/瓶×2

新生儿表角细胞完全培养基100mL

TPY琼脂培养基/TPY Medium用于双岐杆菌的分离培养250克国产/进口

T-24(人膀胱细胞)5×106cells/瓶×2

Daudi(人细胞)5×106cells/瓶×2

GN增菌液/格蓝氏阴性杆菌增菌液/Gram Negative Enrichment Broth用于沙门氏菌和志贺菌的增菌培养250克国产/进口

迪庆绵羊肤成纤维样细胞英文名称：DQSHS1

TBST500ml国产

人成纤维细胞完全培养基100mL

UMR-106(大鼠细胞)5×106cells/瓶×2

改良MRS酸菌琼脂培养基/改良MRS琼脂培养基/MRS Lactotacillus Agar Modified酸菌的测定，双歧杆菌和嗜酸酸菌的计数250克国产/进口

沙保弱氏琼脂平板10块国产/进口
小鼠脑成纤维细胞提取物规格磷酸化Bcl-10抗体 phospho-Bcl 10 (Ser218)

原癌基因Bcl-6抗体 Bcl-6/5

磷酸化细胞死亡调解子抗体 phospho-Bim(Ser87)

磷酸化B-Raf抗体 phospho-B-Raf (Ser365)

磷酸化易感基因1抗体 Phospho-BRCA1 (Ser1524)

芳香烃受体核转录蛋白样1抗体 BMAL1

易感基因复合物亚基蛋白3抗体 BRCC3

转移抑制蛋白BAMBI抗体 BAMBI

胆绿素还原酶抗体 Biliverdin Reductase

BIVM蛋白抗体 BIVM

B淋巴细胞因子9抗体 BCL9

血型Lewis A抗原抗体 Blood Group Lewis a