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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 上海谷研 |
货号 | GOY-0442PC |
保存条件 | 低温冷藏 |
英文名称 | Mouse Brain : Normal Cerebral Vascular Endothelial Cells Derivatives |
保质期 | 详见说明书个月 |
以下是小鼠脑动脉内皮细胞提取物规格产品说明:
小鼠脑动脉内皮细胞提取物规格【Mouse Brain : Normal Cerebral Vascular Endothelial Cells Derivatives】
小鼠脑动脉内皮细胞提取物是从小鼠原代脑动脉内皮细胞提取的,小鼠原代脑动脉内皮细胞从正常小鼠脑组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4>Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。
细胞培养方法:
1、小鼠脑动脉内皮细胞提取物规格细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
注意事项:
冻存细胞接收后小鼠脑动脉内皮细胞提取物规格的处理:
1.干冰运输,收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏;
2.收到细胞后,若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。
复苏细胞接收后的处理:
1.收到细胞后,请首先检查培养瓶是否破损或漏液,培养液是否混浊,如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。
2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后,在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片,若有贴壁细胞脱落,可收集上清离心,将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。
3.建议收到当天不要消化处理,如果细胞长满90%,可选择传代处理。
4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题,出现的细胞问题将不提供免费重发服务。
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大鼠平滑肌细胞完全培养基100mL
Saos-2(人细胞)5×106cells/瓶×2
麦角甾苷规格:1g/支;98%
蛋白标准溶液-BSA5x1ml国产
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BEL-7405(人肝细胞)5×106cells/瓶×2
人非小细胞肺腺细胞英文名称:NCI-H157
小鼠脑动脉内皮细胞提取物规格磷酸化钙调节素抗体 phospho-CaM I (Ser 102)
12号染色体开放阅读框54抗体 C12ORF54
细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体 CstF-64
磷酸化细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体 phospho-CstF64 (Ser83)
磷酸化细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体 phospho-CstF64(Ser498)
CD3抗体 CD3E
CD4抗体 CD4
白细胞共同抗原抗体 CD45
白细胞共同抗原抗体 CD45
间隙连接蛋白36抗体 Connexin-36
白细胞共同抗原抗体 CD45
12号染色体开放阅读框61抗体 C12ORF61