公司有大量的优质细胞，还提供小鼠肾上皮细胞提取物说明书的全程后期服务，可以向专业人士咨询详细的小鼠肾上皮细胞提取物说明书细胞培养条件，冻存方法，及相关培养技术。

小鼠肾上皮细胞提取物说明书【Mouse Kidney：Normal Kidney Derivatives】
 小鼠肾上皮细胞提取物是从小鼠原代肾上皮细胞提取的，小鼠原代肾上皮细胞从正常小鼠肾组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

小鼠肾上皮细胞提取物说明书总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4>Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

小鼠肾上皮细胞提取物说明书【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【细胞冻存】

小鼠肾上皮细胞提取物说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

【注意事项】

注意事项：

1. 收到小鼠肾上皮细胞提取物说明书后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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MDA-MB-436(人腺细胞)戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus

中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii鼠杆菌 Lactobacillus murinus

RWPE-2(人正常细胞)NCI-H209(人小细胞肺细胞)

糙皮侧耳 Pleurotus ostreatus香菇 Lentinula edodes

人腺上皮细胞完全培养基P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠细胞)

棉阿舒囊霉 Ashbya gossypii异常汉逊酵母 Hansenula anomala

威尔酵母 Saccharomyces willianus人脐动脉平滑肌细胞完全培养基

光帽鳞伞 Pholiota nameko鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus

LA795(小鼠肺腺细胞)总状毛霉 Mucor racemosus

天狼星红染色试剂盒茯苓 Poria cocos

RKO-E6(人转基因细胞)NCI-H157(人非小细胞肺腺细胞)

糙皮侧耳 Pleurotus ostreatus苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactisOne Step Western Kit HRP (Rabbit)/一步法快速WB(HRP)试剂盒(兔)
小鼠肾上皮细胞提取物说明书磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗体 phospho-PIK3R1(Tyr368)

Rho鸟甘酸转运蛋白抗体 PDZ RHOGEF/GTRAP48

磷酸化帕金蛋白抗体 phospho-PARK2(Ser101)

磷酸化帕金蛋白抗体 phospho-PARK2(Ser378)

磷酸化血小板源性生长因子受体B抗体 Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr579)

磷酸化血小板源性生长因子受体B抗体 Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716)

P21蛋白激活的蛋白激酶6抗体 PAK6

磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6 phospho-PAK6(Ser165)

非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗体 PTPN7

磷酸化非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗体 phospho-PTPN7 (Ser246)

酪氨酸磷酸酶α抗体 PTPRA

磷酸化非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗体 phospho-PTPN7 (Ser93)