以下是人表皮角质形成细胞取物费用产品说明：

人表皮角质形成细胞取物费用【Human Skin: Normal Epidermal KeratinocytesDerivatives】

人表皮角质形成细胞提取物是从人原代表皮角质形成细胞提取的，人原代表皮角质形成细胞从正常人表皮角质形成组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4>Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
注意事项：
冻存细胞接收后人表皮角质形成细胞取物费用的处理：

1.干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏；

2.收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

复苏细胞接收后的处理：

1.收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

3.建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。

4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

以下是人表皮角质形成细胞取物费用的相关产品：

HREpiC cDNA　人肾上皮细胞cDNA　现货促销　规格:　现货供应　500 ml

HRMC cDNA　人肾系膜细胞cDNA　现货促销　规格:　特价促销　1 ml

HBdSMC cDNA　人膀胱平滑肌细胞cDNA　现货促销　规格:　原装/进口　1 ml

HUC cDNA　人尿道上皮细胞cDNA　现货促销　规格:　现货供应　100 ml

小鼠胃平滑肌细胞　特价促销　500 ml

小鼠纤维环细胞　原装/进口　500 ml

小鼠小肠成纤维细胞　现货供应　500 ml

小鼠小肠平滑肌细胞　特价促销　500 ml
Primary Antibody Diluent/一抗稀释液(绿色)酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis

苜蓿中华根瘤菌炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

SDS-PAGE Loading Buffer (非还原，5x)人膀胱细胞

鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus根瘤菌 Rhizobium sp.

EB-3(人Burkitt细胞)人腺腺细胞

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae芽孢杆菌属 Bacillus sp.

戊糖杆菌 Lactobacillus pentosusNCI-H524(人非小细胞肺细胞)

鼠杆菌 Lactobacillus murinus酸球菌霍氏亚种 Lactococcus lactis subsp. hordniae

PK-15(猪肾细胞)酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

香菇 Lentinula edodes酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

RWPE-2(人正常细胞)人脑微内皮细胞

鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus香菇 Lentinula edodes

人脐平滑肌细胞完全培养基人腺成纤维细胞完全培养基
人表皮角质形成细胞取物费用磷酸化异染色质蛋白1抗体（果蝇） phospho-HP1 alpha (Tyr24)

半乳糖基转移酶2抗体 C1GALT1C1

异染色质蛋白1磷酸化抗体（果蝇） Phospho-HP1(Tyr43)

缺氧诱导因子2α /HIF-2α抗体 HIF 2 alpha

甲型病毒M2抗体 H1N1 matrix protein 2

热休克蛋白-47抗体 HSP47

人类乳头状瘤病毒16抗体 HPV16 E6 protein

缺氧诱导因子1α 抗体HIF-1α HIF-1 Alpha

人类病毒8抗体/病毒8型 HHV8 ORF K2

人类巨细胞病毒抗体 HHV4/CMV

组蛋白H3抗体 Histone H3

人类病毒8抗体 HHV8 ORF50
细胞培养方法：

1、人表皮角质形成细胞取物费用细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。