人组织源细胞提取物规格【Human Cancer: Colon Cancer Tissues Cells Derivatives】
 人组织源细胞提取物是从人原代组织源细胞提取的，人原代组织源细胞从人组织制备。人组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

人组织源细胞提取物规格总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

公司有大量的优质细胞，还提供人组织源细胞提取物规格的全程后期服务，可以向专业人士咨询详细的人组织源细胞提取物规格细胞培养条件，冻存方法，及相关培养技术。

人组织源细胞提取物规格【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【细胞冻存】

人组织源细胞提取物规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

【注意事项】

注意事项：

1. 收到人组织源细胞提取物规格后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

小鼠输尿管平滑肌细胞　现货供应　5 x 10^5 cells/vial

小鼠输尿管上皮细胞　特价促销　1 x 10^6 cells/vial

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Raji(人Burkitt's细胞)5×106cells/瓶×2gersion

小鼠脂肪细胞英文名称：3T3?L1

UVM培养基/UVM Medium李氏菌的增菌培养250克国产/进口

SW480(人细胞)5×106cells/瓶×2

CoC1/DDP(人卵巢耐药细胞亚株)5×106cells/瓶×2

HE琼脂/Hektoen琼脂培养基/肠道病菌培养用琼脂/Hektoen Enteric Agar用于沙门氏菌属和志贺菌属的分离培养250克国产/进口

大鼠肺大平滑肌细胞完全培养基100mL

OVCAR-3(人卵巢细胞)5×106cells/瓶×2

苏木素伊红(HE)染色试剂盒规格：>200次

大鼠外膜成纤维细胞完全培养基100mL

MV3(人细胞)5×106cells/瓶×2

AsPC-1(人*细胞)5×106cells/瓶×2

人肠微内细胞完全培养基100mL
人组织源细胞提取物规格磷酸化原癌基因CBL2抗体 phospho-CBL2 (Tyr674)

原癌基因CBL2抗体 CBL2

β链接素相互作用蛋白1抗体 CTNNBIP1

磷酸化β链接素相互作用蛋白1抗体 phospho-CTNNBIP1 (Thr43+Ser50)

磷酸化β 连环素蛋白抗体 phospho-Beta catenin (Tyr86)

叶绿体蛋白酶抗体（植物） Chloroplast protease

磷酸化后期促进复合蛋白3抗体 phospho-CDC27 (Ser427)

磷酸化丝切蛋白抗体 Phospho-Cofilin (Tyr140)

磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体 Phospho-CHK2 (ser33)

磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体 Phospho-cdc2* (Ser178)

磷酸化丝切蛋白抗体 phospho-CFL1 (Tyr89)

磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体 Phospho-cdc2* (Ser293)