以下是人组织源细胞提取物费用产品说明：

人组织源细胞提取物费用【Human Cancer: Thyroid Cancer Tissues Cells Derivatives】

人组织源细胞提取物是从人原代组织源细胞提取的，人原代组织源细胞从人组织制备。人组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4>Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
注意事项：
冻存细胞接收后人组织源细胞提取物费用的处理：

1.干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏；

2.收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

复苏细胞接收后的处理：

1.收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

3.建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。

4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

以下是人组织源细胞提取物费用的相关产品：

HPC cDNA　人神经束膜细胞cDNA　现货促销　规格:　现货供应　10 μg

HA cDNA　人星形胶质细胞cDNA　现货促销　规格:　特价促销　500 ml

小鼠脾基质细胞　原装/进口　5 ml

小鼠脾源性内皮祖细胞　现货供应　20 reactions

小鼠*CD4+T细胞　特价促销　500 ml

小鼠破骨细胞　原装/进口　500 ml

小鼠气管平滑肌细胞　现货供应　500 ml

小鼠气管上皮细胞　特价促销　500 ml
SK-BR-3(人腺细胞)MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞

植物杆菌 Lactobacillus plantarum大鼠膀胱平滑肌细胞完全培养基

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeMCF-7（MCF7）（ATCC来源）, 人腺细胞

梭形芽胞杆菌 Bacillus fusiformis中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis

嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii

苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti宛氏拟青霉 Paecilomyces variotii

平山正青霉 Eupenicillium hirayamae泾阳链霉菌 Streptomyces jingyangensis

丹参酮IIA 细胞名称

毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipesHCG803/胃细胞

鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosusHUVEC-12, 人脐内皮细胞系

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

链霉菌 Streptomyces sp.弯曲假单胞菌 Pseudomonus geniculata
人组织源细胞提取物费用磷酸化真核翻译起始因子4B抗体 phospho-EIF4B (Ser504)

GLP1类似蛋白Exendin4抗体 Exendin 4

上皮细胞癌转化蛋白2抗体 ECT2

磷酸化转录因子E2F-1抗体 phospho-E2F1 (Ser337)

磷酸化转录因子E2F-1抗体 phospho-E2F1 (Ser332)

磷酸化表皮生长因子受体抗体 phospho-EGFR (Ser1026)

磷酸化表皮生长因子受体抗体 phospho-EGFR (Ser1166)

磷酸化表皮生长因子受体抗体 phospho-EGFR (Ser1190)

磷酸化表皮生长因子受体抗体 phospho-EGFR (Ser1070)

磷酸化表皮生长因子受体抗体 phospho-EGFR (Tyr1125)

磷酸化表皮生长因子受体抗体 phospho-EGFR (Ser695)

磷酸化表皮生长因子受体抗体 phospho-EGFR (Tyr869)
细胞培养方法：

1、人组织源细胞提取物费用细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。