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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 上海谷研 |
货号 | GOY-0371PC |
保存条件 | 低温冷藏 |
英文名称 | The Human Brain: Normal Brain Artery Endothelial Cell Derivatives |
保质期 | 详见说明书个月 |
以下是人脑动脉内皮细胞提取物说明书产品说明:
TT(人甲状腺导管细胞)酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
香菇 Lentinula edodes酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
A875/细胞Plant Protein Extraction Kit/植物蛋白提取试剂盒
产朊假丝酵母 Candida utilis香菇 Lentinula edodes
人大隐内皮细胞完全培养基S-180(小鼠细胞)
黑木耳 Auricularia auricula鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus
爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠肝内胆管上皮细胞完全培养基
松塔牛肝菌 Strobilomyces strobilaceus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
SW 982(人滑膜细胞)泡盛曲霉变种 Aspergillus awamori var.
印第安那亚种 Bacillus thuringiensis subsp. indiana黑白轮枝孢
A549, 人肺细胞系PC-12(高分化),PC12,大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)
假丝酵母 Candida sp.维涅兰德固氮菌 Azotobacter vinelandii
热带假丝酵母 Candida tropicalisRS1(大鼠皮肤成纤维样细胞)
人脑动脉内皮细胞提取物说明书【The Human Brain: Normal Brain Artery Endothelial Cell Derivatives】
人脑动脉内皮细胞提取物是从人脑动脉内皮细胞提取的,人脑动脉内皮细胞从正常人脑动脉组织制备。正常人脑动脉组织采集自各地方医院,采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4>Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。
注意事项:
冻存细胞接收后人脑动脉内皮细胞提取物说明书的处理:
1.干冰运输,收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏;
2.收到细胞后,若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。
复苏细胞接收后的处理:
1.收到细胞后,请首先检查培养瓶是否破损或漏液,培养液是否混浊,如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。
2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后,在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片,若有贴壁细胞脱落,可收集上清离心,将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。
3.建议收到当天不要消化处理,如果细胞长满90%,可选择传代处理。
4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题,出现的细胞问题将不提供免费重发服务。
细胞培养方法:
1、人脑动脉内皮细胞提取物说明书细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
以下是人脑动脉内皮细胞提取物说明书的相关产品:
小鼠颈动脉内皮细胞 特价促销 10 μg
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人脑动脉内皮细胞提取物说明书磷酸化周期素依赖性激酶7抗体 phospho-CDK7 (Thr170)
2号染色体开放阅读框60抗体 C2orf60
磷酸化周期素依赖性激酶9抗体 Phospho-CDK9 (Thr29)
磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体 phospho-CHEK1 (Ser280)
磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体 phospho-CHEK1(Ser317)
磷酸化基因p16抗体 phospho-CDKN2A (Ser140)
磷酸化基因p16抗体 phospho-CDKN2A (Ser152)
磷酸化基因p16抗体 phospho-CDKN2A (Ser8)
磷酸化粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体 phospho-CSF2RB (Tyr766)
磷酸化N-钙粘附分子抗体 phospho-CDH2 (Tyr820)
磷酸化CREB-1抗体 phospho-CREB-1(Ser129)
磷酸化后期促进复合蛋白3抗体 phospho-CDC27 (Thr244)