以下是人脑平滑肌细胞提取物说明书产品说明：

人脑平滑肌细胞提取物说明书【Human Brain Venous: Normal Cerebral Venous Vascular Smooth Muscle Cells Derivatives】

人脑平滑肌细胞提取物是从人原代脑平滑肌细胞提取的，人原代脑平滑肌细胞从正常人脑平滑肌组织制备。正常人脑平滑肌组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4>Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

细胞培养方法：

1、人脑平滑肌细胞提取物说明书细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

注意事项：

冻存细胞接收后人脑平滑肌细胞提取物说明书的处理：

1.干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏；

2.收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

复苏细胞接收后的处理：

1.收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

3.建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。

4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

以下是人脑平滑肌细胞提取物说明书的相关产品：

HPAFL　人肺动脉成纤维细胞裂解物　现货促销　规格:400 μg　现货供应　200 μg

HPAEpiCL　人肺泡上皮细胞裂解物　现货促销　规格:400 μg　特价促销　200 μg

HBEpiCL　人上皮细胞裂解物　现货促销　规格:400 μg　原装/进口　10 μg

HTEpiCL　人气管上皮细胞裂解物　现货促销　规格:400 μg　现货供应　5 x 10^5 cells/vial

HSAEpiCL　人小气道上皮细胞裂解物　现货促销　规格:400 μg　特价促销　20 reactions

HPFL　人裂解物　现货促销　规格:400 μg　原装/进口　200 μg

小鼠细胞，Sp2/0-Ag14细胞　现货供应　5 x 10^5 cells/vial

小鼠细胞，Sp2/0细胞　特价促销　10 μg
WM35, 人细胞

L1210(小鼠细胞)5×106cells/瓶×2

3.5% NaC1鸟氨酸脱羧酶发酵管BR20支国产/进口

大鼠肾动脉内细胞完全培养基100mL

ZR-75-30(人腺细胞)5×106cells/瓶×2

95-D(人高转移肺细胞)5×106cells/瓶×2

NZCYM肉汤/NZCYM BrothBR100克国产/进口

赖氨酸脱羧酶肉汤发酵管BR20支国产/进口

厌氧菌琼脂/GAM琼脂/Anaerobic Agar用于梭菌和其他厌氧菌的分离培养250克国产/进口

Ishikawa(人子宫内膜细胞)5×106cells/瓶×2

BNL CL.2(小鼠胚胎肝细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠成肌细胞英文名称：C2C12

人胚英文名称：MRC-5
人脑平滑肌细胞提取物说明书磷酸激酶α1抗体 PHKA1

胎盘蛋白14抗体 PP14

磷酸化酶激酶γ1 PHKG1

亲环素相关蛋白1抗体 PPIL1

磷酸化酶激酶γ2 PHKG2

肝糖原磷酸化酶抗体 PYGL

肌肉糖原磷酸化酶抗体 PYGM

磷酸羧化酶2抗体 PCK2

蛋白磷酸酶2C亚型α抗体 PP2CA

蛋白激酶C nu型抗体 PRKD3

磷酸葡萄糖酸内酯酶抗体 PGLS

磷酸化蛋白激酶C nu型抗体 phospho-PRKD3(Ser41)