人肾上皮细胞提取物说明书【Human Kidney : Normal Kidney Epithelial Cell Derivatives】
 人肾上皮细胞提取物是从人肾上皮细胞提取的，人肾上皮细胞从正常人肾组织制备。正常人肾组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

人肾上皮细胞提取物说明书总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4>Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

公司有大量的优质细胞，还提供人肾上皮细胞提取物说明书的全程后期服务，可以向专业人士咨询详细的人肾上皮细胞提取物说明书细胞培养条件，冻存方法，及相关培养技术。

人肾上皮细胞提取物说明书【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【细胞冻存】

人肾上皮细胞提取物说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

【注意事项】

注意事项：

1. 收到人肾上皮细胞提取物说明书后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

人主动脉内皮细胞总RNA　  HAEC tRNA　特价促销　5 ml

人主动脉平滑肌细胞总RNA　  HASMC tRNA　原装/进口　5 ml

人心肌细胞总RNA　  HCM tRNA　现货供应　500 ml

人心肌细胞-总RNA　  HCM-a tRNA　特价促销　500 ml

人成纤维细胞总RNA　  HCF tRNA　原装/进口　5 ml

人心肌细胞-心室总RNA　  HCF-av tRNA　现货供应　1000 tests/96 well plate

人心肌细胞-心房总RNA　  HCF-aa tRNA　特价促销　100 ml

SCM　雪旺细胞培养基　现货促销　规格:　500 ml　原装/进口　500 ml
地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis植物杆菌 Lactobacillus plantarum

TRX标签蛋白裂解液人食管平滑肌细胞完全培养基

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大鼠肠巨噬细胞完全培养基人正常胎肝细胞

屎肠球菌 Enterococcus faecium谷氨酸棒杆菌 Corynebacterium glutamicum

RBE, 人肝胆管细胞人非小细胞肺细胞

白地霉 Geotrichum candidum杆菌属 Lactobacillus sp.

SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞CHO, 中国仓鼠卵巢细胞系

大豆慢生根瘤菌植物杆菌 Lactobacillus plantarum

TM4(正常小鼠睾Sertoli细胞)人食管细胞

小鼠睾间质细胞瘤细胞苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

KB/鼻咽细胞人*星状细胞完全培养基

嗜热侧孢(霉) Sporotrichum thermophile
人肾上皮细胞提取物说明书葡萄糖转运蛋白1抗体 GLUT1

高尔基体膜蛋白GP73抗体 GOLPH2

G蛋白结合蛋白2抗体 GBP2

G蛋白结合蛋白2抗体 GBP2

病毒-NS3反转录激活蛋白2抗体 GRAMD3

间隙连接蛋白47抗体 GJC2

神经胶质蛋白(相关基因2)抗体 Gliomedin

糖蛋白磷脂酶D抗体 GPLD1

DNA复制抑制因子抗体 Geminin

G蛋白α抑制蛋白2抗体 G protein alpha Inhibitor 2

G蛋白偶联受体49抗体 GPR49

G蛋白偶联受体γ4抗体 G gamma4