产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH266-B |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | MS |
包装规格 | 50管/48样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 苹果酸合酶(MS)测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
苹果酸合酶(MS)测试盒可见分光光度法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
可见分光光度法 |
50管/48样 |
GOY-SH266-B |
测定意义:
苹果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是属于转移酶中酰基转移酶的一类,主要存在于植物和微生
物中。MS 是乙醛酸循环的关键酶之一,在 MS 催化下乙醛酸与乙酰辅酶 A 反应生成苹果酸。
测定原理:
MS 催化乙酰 CoA 和乙醛酸产生苹果酸,同时生成辅酶 A,辅酶 A 使无色的 DTNB 转变成
黄色的 TNB,在 412nm 处有特征吸光值。
需自备的仪器和用品:
分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、和蒸馏
水
试剂组成和配制:
试剂一:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 25 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 25mL 试剂一充分溶解后使用,用不完的试剂
分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 6 mL 试剂一充分溶解后使用,用不完的试剂分
装后-20℃保存,禁止反复冻融;
样本的前处理:
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量
(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL
试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30
次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,
加入 1mL 试剂一),进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定操作:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 412nm,蒸馏水调零。
2、样本测定
在 1mL 玻璃比色皿中依次加入 100μL 样本、400μL 试剂二,400μL 试剂三和 100μL 试
剂四,混匀,立即记录 412 nm 处反应 5min 时的吸光值 A1 和 10min 时的吸光值 A2,计算
ΔA=A2-A1。
计算公式:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。
MS(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109
]÷(V 样×Cpr) ÷T=147×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每 g 组织每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。
MS(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109
]÷(W ×V 样÷V 样总)÷T=147×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:单位的定义:每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。
MS(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109
]÷(500×V 样÷V 样总)÷T=0.294×ΔA
V 反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:TNB 摩尔消光系数,1.36×104 L / mol /cm;d:比
色光径,1 cm;V 样:加入样本体积,0.1 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应
时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,
500 万。
公司正在出售的产品:
FAM131B Antibody Blocking Peptide | 6-Ethoxydihydrosanguinarine |
TBXT Antibody Blocking Peptide | Dehydrocorydaline |
IBTK Antibody Blocking Peptide | Corynoline |
CCL5 Antibody Blocking Peptide | Crassicauline A |
CSAD Antibody Blocking Peptide | O-Nornuciferine |
VDAC Antibody Blocking Peptide | Stylopine |
C5orf54 Antibody Blocking Peptide | Neoline |
ERV3-1 Antibody Blocking Peptide | Skimmianine |
IFNA2 Antibody Blocking Peptide | Corynoxine |
ABHD15 Antibody Blocking Peptide | N-Feruloyloctopamine |
DPPA5 Antibody Blocking Peptide | Dehydroevodiamine hydrochloride |
Recombinant human IL-23 protein (Active, HEK293) | Glaucine |
RBM15 Antibody Blocking Peptide | N-Methylnuciferine |
Histone H3 (Acetyl-Lys9/14) Antibody Blocking Peptide | N-p-Coumaroyloctopamine |
Recombinant ZIKV Envelope protein, C-His | Dihydrochelerythrine |
KIRREL3 Antibody Blocking Peptide | N-Nornuciferine |
IGF2BP3 Antibody Blocking Peptide | Vincosamide |
CRHR2 Antibody Blocking Peptide | 3-Epiwilsonine |
FGFR4 Antibody Blocking Peptide | Berbamine |
CCK8 Antibody Blocking Peptide | 苹果酸合酶(MS)测试盒可见分光光度法Seneciphylline |
NECTIN1 Antibody Blocking Peptide | N-Feruloyltyramine |
MeV F Antibody Blocking Peptide | Strictosamide |
GLMP Antibody Blocking Peptide | N-p-Coumaroyltyramine |
KDELC2 Antibody Blocking Peptide | 5-Hydroxy-4-methoxycanthin-6-one |