上海谷研实业有限公司
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海藻糖含量测试盒可见分光光度法
  • 品牌:谷研
  • 产地:国产
  • 货号:GOY-SH216-B
  • 价格: ¥350/盒
  • 发布日期: 2018-11-16
  • 更新日期: 2024-11-22
产品详请
产地 国产
品牌 谷研
货号 GOY-SH216-B
用途 仅供科研实验
英文名称
包装规格 50管/48样
纯度 %
CAS编号
别名 海藻糖含量测试盒
分子式
是否进口

海藻糖含量测试盒可见分光光度法


商品属性:

检测方法

规格

货号

可见分光光度法

50管/48样

GOY-SH216-B

测定意义:

海藻糖广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。由于海藻糖具有独特的不同于其他碳 水化合物的生物学特性,能在干旱、高温、脱水、冷冻、高渗透压及毒性物质等恶劣环境下 保护生物体细胞蛋白质、脂肪、糖类、核酸等组分不受损害。 
测定原理:

蒽酮比色法。具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿﹑研钵、浓硫酸(不允许快递) 和蒸馏水。
试剂组成和配制:

提取液:液体 50ml×1 瓶,4℃保存; 试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存;
酶液提取:
 1、细菌或细胞处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液), 超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3S,间隔 10S,重复 30 次),室 温静置 45min,振荡 3~5 次,冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清。 2、组织的处理:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),冰浴匀浆,室温静置 45min,振荡 3~5 次,冷却后,8000g,25℃ 离心 10min,取上清。 3、血清(浆)的处理:按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建 议取 0.1mL 血清(浆)加入 1mL 提取液),冰浴匀浆,室温静置 45min,振荡 3~5 次,冷却 后,8000g,25℃离心 10min,取上清。 
测定操作:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 620nm,蒸馏水调零。 2、 调节水浴锅至 95 度。 3、工作液的配制:临用前在试剂一中加入 7.5mL 蒸馏水后,缓慢加入 42.5mL 浓硫酸,不 断搅拌,充分溶解,待用;用不完的试剂 4℃保存一周; 4、样本测定:取 0.25mL 样本和 1mL 工作液至 EP 管中,95 度水浴 10 min(盖紧,防止水 分散失),自然冷却至室温,在 620 nm 波长下记录测定吸光度值 A。 注意:由于工作液具有强腐蚀性,请谨慎操作。 若吸光值大于1,请将样本用提取液稀释后再测定,计算公式中乘以相应的稀释倍数。 
计算公式:
 1、标准条件下测定回归方程为 y = 8.8976x+0.0729;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。 2、按样本鲜重计算: 海藻糖含量(mg/g 鲜重)= [V1×(A -0.0729)÷8.8976]÷(W×V1÷V2)=0.112×(A -0.0729) ÷W。 3、按样本蛋白浓度计算: 海藻糖含量(mg/mg prot)=[ V1×(A -0.0729) ÷8.8976]÷(V1×Cpr)=0.112×(A -0.0729) ÷Cpr。 4、按细菌或细胞密度计算: 海藻糖含量(μg/104 cell)=[1000×V1×(A -0.0729) ÷8.8976]÷(500×V1÷V2)=0.224×(A -0.0729) 5、血清(浆)海藻糖含量计算 海藻糖含量(mg/mL)=[V1×(A -0.0729)÷8.8976 )]÷(V3×V1÷V2)=1.12×(A -0.0729) 1000:1mg/mL=1000μg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,0.25 mL;V2:加入提取液总 体积 1mL;V3:加入血清(浆体积),0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质 量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。 注意: 检测限为 10μg/g 鲜重或 0.1μg/ mg prot
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