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考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒可见分光光度法
  • 品牌:谷研
  • 产地:国产
  • 货号:GOY-SH234-B
  • 价格: ¥60/盒
  • 发布日期: 2018-11-15
  • 更新日期: 2024-11-22
产品详请
产地 国产
品牌 谷研
货号 GOY-SH234-B
用途 仅供科研实验
英文名称
包装规格 50管/48样
纯度 %
CAS编号
别名 考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒
分子式
是否进口

考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒可见分光光度法


商品属性:

检测方法

规格

货号

可见分光光度法

50管/48样

GOY-SH234-B

测定意义:

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分 析。
测定原理:

在酸性溶液中,考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在 620nm 处有 吸收峰, 其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分 析。 自备仪器和用品: 离心机、分光光度计、石英比色皿、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制:

试剂一:液体 30 mL×1 瓶,4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取:
 1. 液体样品:澄清液体样品可以直接测定。 2. 组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:20 的比例(建议称取约 0.05 g 组 织,加入 1mL 提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水)) 冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清,即待测液。(动物样品常常需要稀释) 3. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建 议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
测定操作:
 1. 分光光度计预热 30 min,蒸馏水调零。 2. 在石英比色皿中加入: 试剂(μL) 测定管 空白管 样本 500 蒸馏水 500 试剂一 500 500 混匀后,测定波长 620 nm 吸光值,△A=A 测定-A 空白。 注意: 1、 空白管只需要测定一次。 2、 测定管的待测样品蛋白质浓度要控制在 1-100μg/mL 范围内,尽量控制在中间范围。 3、 测定管若出现浑浊或分层现象,就说明蛋白含量较高,通常须将待测液用提取液稀释 10~20 倍后重新检测。 
计算公式:
 标准曲线:y = 14.253x - 0.0007;R2 = 0.9997;x: 蛋白标准品浓度(mg/mL;线性范围 为 0.001~0.1mg/mL); y: 吸光值差值 1.按液体样本体积计算:Cpr(mg/mL)=(△A+0.0007)÷14.253 =0.07×(△A+0.0007) 2.按组织样本质量计算:Cpr(mg/g 鲜重)=(△A+0.0007)÷14.253×V 总÷W =0.07×(△A+0.0007)÷W V 总:提取液体积,1 mL; W:样本质量,g。
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