产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH252-B |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | |
包装规格 | 50管/24样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 麦芽糖含量测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
麦芽糖含量测试盒可见分光光度法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
GOY-SH252-B |
测定意义:
麦芽糖是由两个葡萄糖单位经由α-1,4 糖苷键连接而成的二糖,又称麦芽二糖。麦芽糖是
淀粉、糖原、糊精等大分子多糖类物质在β-淀粉酶催化下的主要水解产物,再经麦芽糖酶
催化,则被水解成两个葡萄糖分子。麦芽糖不仅参与了生物体内糖代谢,其在食品和医药工
业等行业也着广泛应用,是产品质量控制的重要指标之一。
测定原理:
麦芽糖酶将样品中麦芽糖水解为葡萄糖; 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生
过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在 505
nm 有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水
试剂组成和配制:
试剂一:液体 35mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加 3 mL 试剂一溶解后待用,用不完的试剂分装后-20℃
保存;
试剂三:液体 25ml×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 25ml×1 瓶,4℃保存;
酶液提取:
按照样本质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
试剂一),研磨成匀浆,95℃水浴 10 分钟(盖紧,防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离
心 10min,取上清液备用。
测定操作:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 505nm,蒸馏水调零
2、 混合试剂的配制:使用前将试剂三和试剂四 1:1 等体积混合,用多少配多少。
3、 测定管:取 200μL 上清,加入 100μL 试剂二,混匀,55℃反应 60 min,待测。
对照管:取 200μL 上清,加入 100μL 试剂一,混匀,55℃反应 60 min,待测。
4、加样表(在 EP 管中加入下列试剂):
试剂(μL) 测定管 对照管
测定管待测液 200
对照管待测液 200
混合试剂 800 800
混匀,40℃保温 30 min 后,于 505nm 波长处读取吸光度。测定管和对照管吸光值分别记为
A 测定和 A 对照。ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
计算公式:
标准条件下测定回归方程为 y = 5.7888x + 0.0052;R2 = 0.9997;x 为标准品浓度(mg/mL),
y 为吸光值差值。
麦芽糖(mg/g 鲜重)=(ΔA-0.0052) ÷5.7888×V 总÷W=0.1728×(ΔA-0.0052)÷W
V 总:加入提取液体积,1 mL;W:样本质量,g
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