木质素含量测试盒微量法

商品属性：

测定意义：

木质素是构成植物细胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇构成的一类物质，存在于木质组织 中，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁。木质素主要位于纤维素纤维之间，起抗压作 用。
测定原理：

木质素中的酚羟基发生乙酰化后在 280nm 处有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低与木质素 含量正相关。 需自备的仪器和用品、 天平、40 目筛，玻璃试管、烧杯、离心机，恒温水浴锅、封口膜、烘箱、紫外分光光度计/ 酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、高氯酸。
试剂组成和配制：

试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。 试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。 试剂三：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。（如有结冰，临用前 37℃水浴解冻后使用）
样品处理：
 样品 80℃烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛，称取约 2mg（记为 W）于 10mL 玻璃试管中（务 必用玻璃试管，不可用 Ep 管） 
测定操作：
 空白管 测定管 样本（mg） 2 试剂一（μL） 500 500 高氯酸（μL） 20 20 于 10mL 玻璃试管中，用封口膜密封，充分混匀，80℃水浴 40min，每隔 10min 震 荡一次，然后自然冷却 试剂二（μL） 500 500 充分混匀 上清（μL） 20 20 试剂三（μL） 980（参照注意事项四） 980（参照注意事项四） 取 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板，测定 280nm 处吸光值 A。分别记为 A 空白 管和 A 测定管，ΔA=A 测定管-A 空白管
计算公式：
 标准曲线：y = 0.0347x+0.0068，R2 =0.9889 Lignin（mg/g 干重）= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V 反总×10-3 ÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷0.002×50 V 反总：反应总体积：1.02mL；W：样本质量，g；T：稀释倍数注意事项 1. 试剂一有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出。 2. 加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人身伤害。 3. 试剂三具有强刺激性，建议操作过程全部在通风橱子操作。 4. 取上清加试剂三步骤根据自己样品乙酰化程度，试剂三的用量可调整，保证吸光值在 0.1-0.8 之间即可，并在公式中参与计算。
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