山梨醇含量测试盒可见分光光度法

商品属性：

测定意义：

山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是糖运输形式之一，而且与生物 抗逆性和食物风味密切相关。因此，在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含 量变化。
测定原理：

山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物，在 655nm 波长有特征吸收峰。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：

试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：液体 10mL×1 瓶 ，4℃保存。
提取：
 按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.2g 组织，加入 2mL 蒸馏水），研磨成匀浆， 95℃水浴 10 分钟（盖紧，以防止水分散失），冷却后，8000g，25℃ 离心 10min，取上清液待测。
测定操作：
 1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 655nm，蒸馏水调零。 2、加样表（在 EP 管中依次加入下列试剂）： 试剂（μL） 空白管 测定管 试剂一 150 150 试剂二 140 140 样本 1000 蒸馏水 1000 混匀后室温静置 15min，8000g，25℃离心 10min，取上清液测 655nm 下吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 空白管。空白管只要做一管。
计算公式：
 1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.352x - 0.002；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。 2、按照样本质量计算 山梨醇含量（mg /g 鲜重）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA＋0.002) ÷W 3、按照样本蛋白浓度计算 山梨醇含量（mg /mg prot）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA＋0.002) ÷Cpr V1：加入样本体积，1mL；V2：加入提取液体积，2 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL； W：样本质量，g 注意： 检测限为 1μg/g 鲜重或 0.01μg /mg prot
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