产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH285 |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | |
包装规格 | 100管/96样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 生物碱含量测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
生物碱含量测试盒微量法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
微量法 |
100管/96样 |
GOY-SH285 |
测定意义:
生物碱是存在于自然界(主要为植物)中的一类含氮的碱性有机化合物,大多数有复杂的环
状结构,氮素多包含在环内,有显著的生物活性,是中草药中重要的有效成分之一。
测定原理:
生物碱与溴甲酚绿指示剂反应,生成绿色化合物,在 416nm 处有 吸收峰。 需自备的仪器和用品:
酶标仪、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、96 孔板、研钵、80%乙醇、氯仿和蒸馏
水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 30mL × 1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 12mL × 1 瓶,4℃避光保存;
提取:
样本烘干粉碎,过 80 目筛。称取约 0.1g 样本,加入 1mL80%乙醇,充分混匀后转移到 EP
管中,超声波提取 60min, 8000 g,25℃离心 10 min,取上清液待测。
测定操作:
1、酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 416nm 处。
2、操作表:在 EP 管中加入如下试剂
试剂名称(μL) 空白管 测定管
样本 50
80%乙醇 50
试剂一 250 250
试剂二 100 100
混匀,室温静置 5min
氯仿 500 500
剧烈振荡混匀,室温静置 40min,吸取下层氯仿层 200μL 于 96 孔板,416nm 处读取吸光值
A,ΔA=A 测定-A 空白,空白管只要做一管。
计算公式:
标准条件下测定的回归方程为 y = 3.0209x - 0.0117,R
2 = 0.999;x 为标准品浓度(mg/mL),
y 为ΔA。
生物碱含量(mg/g 干重)=(ΔA+0.0117)÷3.0209×V 样总÷W=0.331×(ΔA+0.0117) ÷W
V 样总:加入提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g。
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