免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

参数规格：

抗体的生活习性：

(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。

(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。

(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。

(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。

实验步骤:

① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。

② α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间（参考：30min）。

③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。

④ 取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：

（-）无荧光；（±）极弱的可疑荧光；（+）荧光较弱，但清楚可见；（++）荧光明亮；（+++ --++++）荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为（±）或（-），即可判定为阳性。

抗体的多样性：

抗体的异质性。抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的免疫球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。

因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。
小鼠肾小球足细胞Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser134) (E9R9W) Rabbit mAb

小鼠食管成纤维细胞KIF3A (D7G3) Rabbit mAb

小鼠食管平滑肌细胞Insulin (C27C9) Rabbit mAb (PE Conjugate)

小鼠食管上皮细胞FLIP (D16A8) Rabbit mAb

小鼠视网膜色素上皮细胞Stargazin (D33G3) Rabbit mAb

小鼠视网膜微内皮细胞Nischarin (D6T4X) Rabbit mAb

小鼠输卵管平滑肌细胞β2-Adrenergic Receptor (D6H2) Rabbit mAb

小鼠输卵管上皮细胞Phospho-p53 (Ser15) (16G8) Mouse mAb (PE Conjugate)

小鼠输尿管平滑肌细胞DFCP1 (E9R6P) Rabbit mAb

小鼠输尿管上皮细胞TBP Antibody

小鼠髓核细胞Palladin (D9H2) Rabbit mAb

小鼠外根鞘细胞Caspase-14 Antibody

小鼠胃成纤维细胞Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)

小鼠胃黏膜成纤维细胞IGF-I Receptor β (D23H3) XP®Rabbit mAb (Biotinylated)
α-Actinin (E7U1O) Mouse mAb4-(反式-4-基环己基)苯总胆固醇(TC)比色法测试盒(单试剂COD-PAP法)

四水合钇(III)游离脂肪(NEFA)比色法测试盒

奥沙拉嗪二醛(MDA)比色法测试盒(TBA法)

6-(5-氯-2-啶基)-6,7-二-7-羟基-5H-咯并[3,4-b]嗪-5-酮植物二醛(MDA)比色法测试盒

2-溴-3-己基噻吩脂质过物(LPO)比色法测试盒

3-氨基-5-(三氟基)苯总胆固醇(TC)比色法测试盒(单试剂COD-PAP法)

(S)-(+)-2-(氧基)咯烷硫代反应物(TBARS)比色法测试盒

2-氯-6--3-羟基啶硫代反应物(TBARS)荧光法测试盒

(2R,4S)-5-(联苯-4-基)-4-[(叔氧基脯氨(Pro)比色法测试盒

2-溴-1,3-二氟-5-苯植物类黄酮比色法测试盒

1-(2,3-二基苯基)醇植物总酚比色法测试盒

4-戊单组分TMB显色液

酰肼二步法IHC检测试剂盒（Poly-HRP Anti Rabbit/Mouse IgG）