免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

参数规格：

抗体的生活习性：

(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。

(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。

(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。

(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。

实验步骤:

① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。

② Cavin-1 (D1P6W) Rabbit mAb滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间（参考：30min）。

③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。

④ 取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：

（-）无荧光；（±）极弱的可疑荧光；（+）荧光较弱，但清楚可见；（++）荧光明亮；（+++ --++++）荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为（±）或（-），即可判定为阳性。

抗体的多样性：

抗体的异质性。抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的免疫球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。

因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。
人卵巢透明细胞癌细胞，ES-2细胞PathScan® Phospho-NF-κB p65 (Ser536) Sandwich ELISA Kit

人卵巢腺癌细胞，OVCAR-3细胞PathScan® Total NF-κB p65 Sandwich ELISA Kit

人细胞系，K562细胞PathScan® Phospho-MEK1 (Ser217/221) Sandwich ELISA Kit

人慢性粒细胞细胞，KCL-22细胞PathScan® Phospho-cdc2 (Tyr15) Sandwich ELISA Kit

人膜间皮细胞，MET-5A细胞PathScan® Phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) Sandwich ELISA Kit

人男性正常龟头细胞，Hs68细胞PathScan® Total 4E-BP1 Sandwich ELISA Kit

人脑细胞,HS683细胞Btk (D3H5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

人脑细胞，A172细胞DLL3 (E3J5R) Rabbit mAb

人脑胶质细胞株(正常)，HEB细胞CRBN (D8H3S) Rabbit mAb

人脑微内皮细胞，HBMEC细胞PathScan®Phospho-Bad (Ser112) Sandwich ELISA Kit

人脑星形胶质母细胞瘤，U-87 MG细胞PathScan® Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) Sandwich ELISA Kit

人脑星形胶质母细胞瘤，U-118MG细胞PathScan® Phospho-EGF Receptor (Tyr845) Sandwich ELISA Kit

人胚，HELF细胞PathScan® Cleaved Caspase-3 (Asp175) Sandwich ELISA Kit

人胚，MRC-5细胞PathScan® Cleaved Notch1 (Val1744) Sandwich ELISA Kit
Cavin-1 (D1P6W) Rabbit mAb3-羟基猪圆环病毒2型抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）

Methanesulfonic acid,1,1-dimethylethyl ester猪3ABC抗体（IgG）诊断试剂盒（酶联免疫法）

中文名称猪伪狂犬gE鉴别ELISA诊断试剂盒

1-叔氧羰基-4-氨基哌啶猪病毒O型抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）

7-Benzyl-2,4-dichloro-5,6,7,8-tetrahydropyrido[3,4-d]pyrimidine牛、羊布氏杆菌抗体快速检测卡（检血清/血浆/全血，25条/盒)

2-(Ethoxycarbonyl)ethyltriphenylphosphonium bromide牛布氏杆菌抗体快速检测卡（检牛血清/血浆/全血，25条/盒）

6-溴-2-嗪羧酯牛抗体检测卡（检牛血清/血浆/全血，25条/盒）

5-溴-2-苯并恶唑酮羊布氏杆菌抗体快速检测卡（检羊血清/血浆/全血，25条/盒）

(5-Ethoxy-2-fluorophenyl)boronic acid黄曲霉毒素M1快速检测试纸条（检牛奶，检测限0.5ppb，比色法）2016-02-19

4-溴腈黄曲霉毒素M1快速检测试纸条（检牛奶，检测限0.3ppb，比色法）2016-02-19

2-氟-6-基苯黄曲霉毒素M1快速检测试纸条（检牛奶，检测限0.1ppb,比色法）2016-02-19

3-Pyridinol,6-chloro-5-fluoro-黄曲霉毒素B1快速检测卡（检饲料/粮食，灵敏度2.5ppb--50ppb，消线法）2016-01-26

Methyl 6-chloropyrazine-2-carboxylate玉米赤霉烯酮试纸条（检玉米油，60ppb,比色法）2016-01-25