免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

参数规格：

抗体的生活习性：

(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。

(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。

(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。

(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。

实验步骤:

① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。

② PathScan® Phospho-Akt1 (Ser473) Sandwich ELISA Kit滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间（参考：30min）。

③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。

④ 取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：

（-）无荧光；（±）极弱的可疑荧光；（+）荧光较弱，但清楚可见；（++）荧光明亮；（+++ --++++）荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为（±）或（-），即可判定为阳性。

抗体的多样性：

抗体的异质性。抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的免疫球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。

因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。
全血基因组DNA纯化试剂盒NAC1 Antibody (Rodent Preferred)

大量全血基因组DNA纯化试剂盒（20毫升全血）Phospho-AMPKα1 (Ser485) Antibody

树脂法微量全血DNA纯化试剂盒Phospho-AMPKα1 (Ser485)/AMPKα2 (Ser491) Antibody

全血线粒体DNA萃取试剂盒Phospho-AMPKβ1 (Ser182) Antibody

白细胞裂解液Acetyl-CoA Carboxylase 1 Antibody

血清样品树脂法去内毒素试剂盒Cripto (D81B12) Rabbit mAb (Human Specific)

血清样品液相法去内毒素试剂盒Sox1 Antibody

血清样品沉淀法去内毒素试剂盒Sox2 (L73B4) Mouse mAb

动物血小板线粒体粗提分离试剂盒SignalSlide® Mouse PD-L1 IHC Controls

动物血小板活性线粒体分离试剂盒LIN28B Antibody

动物血小板高质纯化线粒体分离试剂盒PSMD14 (D18C7) Rabbit mAb

血影细胞（GHOST）制备试剂盒IL-2Rβ Antibody

血影细胞膜荧光染色试剂盒Rig-I (D33H10) Rabbit mAb

血影细胞膜尼罗红荧光染色试剂盒p75NTR (D8A8) Rabbit mAb
PathScan® Phospho-Akt1 (Ser473) Sandwich ELISA Kit2-酰基-4-氟苯酚金黄色葡萄球菌*

4-羟基-3-基苯香菇

2-咯酯五通桥毛霉

3-羟基-4-氧基苯腈印度芽孢杆菌

2-羟基烟醛指状青霉

4-氨基-3-基啶长双歧杆菌

2-(4-溴苯基)-1-苯基-1H-苯并咪唑酵母

3-基-2-硝基苯醚小孢囊杆菌

3-咯醛球毛壳

4-啶盐盐酿酒酵母

L-苯基甘氨酯盐盐里氏木霉

Cobalt,[[2,2'-[(1R,2R)-1,2-cyclohexanediylbis[(nitrilo-kN)methylidyne]]bis[4,6-bis(1,1-dimethylethyl)phenolato-kO]](2-)]-, (SP-4-2)-白色假丝酵母*

1,2-双(联苯膦烷)氯化镍枯草芽孢杆菌