免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

参数规格：

抗体的生活习性：

(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。

(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。

(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。

(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。

实验步骤:

① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。

② SimpleChIP® Human HES4 Promoter Primers滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间（参考：30min）。

③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。

④ 取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：

（-）无荧光；（±）极弱的可疑荧光；（+）荧光较弱，但清楚可见；（++）荧光明亮；（+++ --++++）荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为（±）或（-），即可判定为阳性。

抗体的多样性：

抗体的异质性。抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的免疫球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。

因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。
冰冻切片组织HISTONE H3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒PhosphoPlus® Rictor (Thr1135) Antibody Duet

石蜡切片组织HISTONE H3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒LRP5 (D80F2) Rabbit mAb

 载玻片细胞HISTONE H3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒Phospho-NF-κB p65 (Ser536) (93H1) Rabbit mAb (PE Conjugate)

 冰冻切片组织HISTONE H3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒C1QBP Antibody

 石蜡切片组织HISTONE H3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb (Sepharose®Bead Conjugate)

 细胞HISTONE H3蛋白表达比色法定量检测试剂盒p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb (Sepharose®Bead Conjugate)

 细胞HISTONE H3蛋白表达荧光定量检测试剂盒Tri-Methyl-Histone H4 (Lys20) (D84D2) Rabbit mAb

 HISTONE H3蛋白表达西方杂交分析试剂盒TIMP2 (D18B7) Rabbit mAb

HISTONE H3蛋白免疫共沉淀分析试剂盒RalBP1 (D87H8) Rabbit mAb

HISTONE H3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒Arf6 (D12G6) Rabbit mAb

 细胞NF KAPPA B P65蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (PE Conjugate)

载玻片细胞NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒IκBα (L35A5) Mouse mAb (Amino-terminal Antigen) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)

冰冻切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒MEK1 (61B12) Mouse mAb (Biotinylated)

石蜡切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒EGF Receptor (E746-A750del Specific) (D6B6) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
SimpleChIP® Human HES4 Promoter Primers

Cytokeratin 7+17 antibody [C-46]原装、分装链霉亲和AP标记

Alkaline Phosphatase Enhancer原装、分装腺苷5' -二

DAB Enhancer原装、分装琼脂

Myosin light chain 3 antibody [MLM527]原装、分装鸟苷

smooth muscle Myosin heavy chain 11 antibody [1G12]原装、分装植物血凝素- L

non-muscle Myosin IIB/MYH10 antibody [3H2]原装、分装胶原酶A

Aflatoxin antibody [1C6]原装、分装ELISA检测阻断试

Serum Amyloid A antibody [115]原装、分装基苯基聚二醇

TAG72 antibody [B72.3]原装、分装端粒酶

2-硝基咪唑Tween-20 吐温-20

3-苄氧基-1-醇Tween-20 吐温-20

雌二醇TRIS-HCl Tris盐

2-基-2-咪唑啉TRIS-HCl Tris盐

[1,1'-联苯]-2-羧，4,4-二基Tween-80 吐温-80

5-溴-1,2,4-三苯Tween-80 吐温-80

1,2-Propanediol,2-methyl-Urea 尿素

氰基N-羟基二酰亚胺酯Urea 尿素

5-酰基-2,8-二羟基Urea 尿素

卡托普利Shikimic acid 莽草

(R)-缩水甘油酯Ursolic acid 熊果

N-Boc-哌嗪8-苯胺-1-萘磺 8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid-ANSA

2-酰基苯Baicalin 黄芩苷