P53 elisa试剂盒使用方法

P53 elisa试剂盒使用方法:

    夹心法

    夹心法常用于检测大分子抗原，一般之操作步骤为：

    1、将具有专一性之抗体固著（coating）于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体；

    2、加入待测检体，检体中若含有待测之抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结；

    3、洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一次抗体，与待测抗原进行键结；

    4、洗去多余未键结一次抗体，加入带有酵素之二次抗体，与一次抗体键结；

     5、洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果。

    间接法

    间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为：

    1、将已知之抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余之抗原；

    2、加入待测检体，检体中若含有待测次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结；

    3、洗去多余待测检体，加入带有酵素之二次抗体，与待测次抗体键结；

    4、洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。