Calcyphosine 2抗体分子标记技术

Calcyphosine 2抗体分子标记技术：
（一）原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为残基,残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
（二）准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；

（三）操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；
2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；
6.碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

phospho-beta Actin (Tyr53) 磷酸化β-肌动蛋白抗体
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346) 磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-AR 抗体
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356) 磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体
APOD 载脂蛋白D抗体
ASIC1/BNaC2/ASIC1A 酸敏感离子通道1抗体
ADAR1 (C-terminus) 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体（C端）
AF10 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体
ADCY1 腺苷酸环化酶1抗体
APC 腺瘤样息肉抗体
AGPAT1 溶血磷脂酰基转移酶抗体
ANKS3 锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体
phospho-ALK (Tyr1586) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
ACADVL 酰基辅酶A脱氢酶很长链抗体
AMSH 信号转导衔接结合蛋白抗体
ASB3 锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体
Aurora C 有丝分裂激酶B抗体
Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗体
Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗体
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗体
Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有丝分裂激酶A抗体
phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗体