大鼠直肠组织提取物细胞处理步骤

大鼠直肠组织提取物细胞处理步骤：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

BC-021(人乳腺癌细胞)
BC-022(人乳腺癌细胞)
BE(2)-M17(人神经母细胞瘤细胞)
BGC-803(人胃癌细胞)
C918(人眼脉络黑色素瘤细胞)
CAL-27(人舌鳞癌细胞)
LS 180(人结肠腺癌细胞)
CNE-2Z(人鼻咽癌细胞)
COLO 201(人结直肠腺癌细胞)
CW-2(人结肠癌细胞)
CRT(人神经胶质瘤细胞)
D283 Med(人脑髓母细胞瘤细胞)
EA.hy926(人脐静脉细胞融合细胞)
ECV-304(人脐静脉内皮细胞)
EJ(人膀胱癌细胞)
H-97(人高转移肝癌细胞)
HCC94(人子宫鳞癌细胞（高分化）)
HCCLM3(人高转移肝癌细胞)
HEL(人红白细胞白血病细胞)
HELF(人胚肺成纤维细胞)
HO-8910PM(人高转移卵巢癌细胞)
Ishikawa(人子宫内膜癌细胞)
L-O2(人正常肝细胞)
M1(小鼠白血病细胞)
M14(人黑色素瘤细胞)
MA-891(小鼠乳腺癌高转移细胞)
MDA-MB-435(人乳腺癌高转移细胞)