腺样癌特异性相关抗原EMC1抗体的生物素化标记实验要点

腺样癌特异性相关抗原EMC1抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

连接介导调节蛋白抗体
氨基末端激酶3抗体
磷酸化活化蛋白激酶B抗体
JmjC结构域组蛋白去甲基化酶H3-K36抗体
组蛋白去甲基化酶JARID2抗体
JAK和微管相互作用蛋白2抗体
活化蛋白激酶B抗体
磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗体
凋亡细胞清除受体抗体
磷酸化原癌基因c-Jun抗体
Notch配体Jagged 2蛋白抗体
组蛋白去甲基化Jarid1C抗体
组蛋白去甲基转移酶JMJD1B抗体
亲联蛋白2抗体
驱动蛋白家族蛋白13B抗体
驱动蛋白家族蛋白7抗体
CREB结合蛋白抗体
脑蛋白9抗体
丝裂原诱导蛋白2抗体
锌指蛋白393抗体
组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1抗体
驱动蛋白样蛋白1抗体
组蛋白甲基化KMT3B抗体
离子通道蛋白Kv4.3抗体
Killin-p53调节复制抑制蛋白抗体
赖氨酸tRNA的连接酶抗体
220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体
磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体
基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体C端