真菌种属鉴定实验步骤

真菌种属鉴定实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解

(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)

自分泌运动因子抗体
酪氨酸蛋白激酶A3受体抗体
EHM2蛋白抗体
磷酸化真核翻译起始因子4E抗体
翻译延伸因子EF-1a抗体
磷酸化雌激素受体α抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
酪氨酸蛋白激酶受体B4抗体
酪氨酸蛋白激酶A5受体抗体
上皮钠离子通道蛋白γ/γENaC抗体
癌基因ETS2抗体
内皮素3抗体
磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
细胞外信号调节激酶4抗体
肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体
CD312抗体
eIF4E结合蛋白抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
肝配蛋白A1受体抗体
真核翻译起始因子2C2抗体
眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体
EYA4蛋白抗体
血清反应因子辅助蛋白1抗体
吞噬细胞运动蛋白2抗体
红细胞膜条带4.1蛋白抗体
磷酸化红细胞生成素受体抗体